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        技術(shù)文章

        ATP熒光儀


        ATP熒光儀

        ¤ 背景

        預(yù)防良好衛(wèi)生規(guī)范 (GHP)對(duì)保證食品**來(lái)說(shuō)是必不可少的,這些已成為法律法規(guī)的食品衛(wèi)生規(guī)范常常作為生產(chǎn)**可靠的食品而采取的一種先進(jìn)的預(yù)防性措施------危害分析及關(guān)鍵控制點(diǎn)(HACCP)的前提條件。

        預(yù)防預(yù)防食物中毒是任何食品**系統(tǒng)的關(guān)鍵。食物中毒通常是由于微生物的繁殖引起的,主要原因包括生、熟制品未能合理分隔開,加工及/或儲(chǔ)藏時(shí)的不適當(dāng)溫度控制,交叉污染和不潔凈的衛(wèi)生設(shè)施等。作為一項(xiàng)主要的預(yù)防措施,GHP能對(duì)潛在的問(wèn)題進(jìn)行監(jiān)控。同時(shí)良好的清潔程序也可以降低成本(包括原材料和勞動(dòng)時(shí)間)、減少資源浪費(fèi)和延長(zhǎng)產(chǎn)品的保質(zhì)期。由于在清潔和衛(wèi)生設(shè)施技術(shù)和實(shí)踐方面認(rèn)識(shí)的不**,常常導(dǎo)致化學(xué)**用品的無(wú)效使用和浪費(fèi)。清潔劑和**劑的選擇與應(yīng)用有其本身的科學(xué)性,它的使用劑量、接觸時(shí)間及溫度的合理選擇是發(fā)揮其*佳的使用條件的關(guān)鍵。在使用**劑之前,應(yīng)首先使用清潔劑來(lái)去除表面的有機(jī)殘留物。有效地去除產(chǎn)品殘留物是至關(guān)重要的,因?yàn)檫@一過(guò)程不僅**了總的污染物(有機(jī)雜質(zhì)和90%的微生物),也消除了支持微生物生存及生長(zhǎng)的環(huán)境。因此有效地**產(chǎn)品殘留物比**殘留微生物重要得多。如何評(píng)估清潔過(guò)程的有效性對(duì)保障清潔效果是非常重要的,目前主要采用的方法有以下幾種:

         傳統(tǒng)方法

        直到 20世紀(jì)80年代,檢測(cè)食品表面衛(wèi)生狀態(tài)的**方法是基于瓊脂平板計(jì)數(shù)的傳統(tǒng)培養(yǎng)方法。傳統(tǒng)方法提供了表面存在的微生物數(shù)目,同時(shí)也可對(duì)微生物的品種進(jìn)行判別。然而這類方法無(wú)法告知表面是否存在有支持微生物生長(zhǎng)繁殖的食品殘留物。

        微生物檢測(cè)需要嫻熟的技術(shù)人員在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)操作。雖然傳統(tǒng)微生物檢測(cè)方法從使用的方便性等方面已做了很大改進(jìn),形式也更加多樣,但其檢測(cè)結(jié)果依然需要24-72小時(shí)后方能得到,這對(duì)于衛(wèi)生設(shè)施和生產(chǎn)過(guò)程中所需的潔凈信息的反饋和確保高品質(zhì)食品而言顯然是太慢了。

         理想檢測(cè)

        清潔的主要目的是去除產(chǎn)品殘留物,所以判斷清潔效果和衛(wèi)生狀態(tài)的理想檢測(cè)是檢測(cè)產(chǎn)品本身的殘留物。這類檢測(cè)方法應(yīng)該是快速而又操作簡(jiǎn)便,不需要實(shí)驗(yàn)室即可由衛(wèi)生監(jiān)控人員進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)或在線檢測(cè)。這類檢測(cè)方法主要有ATP生物發(fā)光和變色檢測(cè)等.

         ATP生物發(fā)光法

        20世紀(jì)80年代ATP生物發(fā)光檢測(cè)法被用于食品及衛(wèi)生監(jiān)督中的微生物檢查。生物發(fā)光計(jì)數(shù)法是一種經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)化的生物化學(xué)方法,利用ATP與熒光素-熒光素酶復(fù)合物的反應(yīng)來(lái)測(cè)定是否存在三磷酸腺苷(ATP)。該法可用于食品中微生物總數(shù)的測(cè)定。生物發(fā)光反應(yīng)需要ATP、熒光素和螢火蟲熒光素酶。反應(yīng)期間熒光素被氧化并發(fā)出熒光,光子的數(shù)量可采用ATP熒光儀進(jìn)行測(cè)量,光子的數(shù)量的ATP含量成正比。因?yàn)槊糠N微生物細(xì)胞中的ATP含量是恒定的,所以樣品中ATP含量與樣品中微生物的數(shù)量有關(guān)。ATP熒光儀*快能在15秒鐘內(nèi)測(cè)定食品中是否存在酵母菌、霉菌或細(xì)菌細(xì)胞,靈敏度可達(dá)1個(gè)微生物/200mL (Anon 1987)

        由于該方法能迅速獲得測(cè)定結(jié)果,因此其使用日益廣泛。一般來(lái)說(shuō),產(chǎn)品從微生物檢測(cè)到銷售中心再到零售商手中需要數(shù)天或數(shù)十天左右。采用快速微生物檢測(cè)法(如生物熒光檢測(cè)法)可以使產(chǎn)品的發(fā)送不超過(guò)24小時(shí)。盡管ATP生物熒光檢測(cè)計(jì)數(shù)法從20世紀(jì)80年代中期就開始使用,但是直到20世紀(jì)90年代中期才廣泛應(yīng)用于食品加工業(yè)及其它行業(yè)中,主要原因是各項(xiàng)技術(shù)的進(jìn)步使得這種微生物快速檢測(cè)法的應(yīng)用得以實(shí)現(xiàn)。由于這種方法檢測(cè)速度快、能減少食品再受到污染的風(fēng)險(xiǎn),因而成為一種可靠的快速檢測(cè)微生物污染的方法。盡管人們認(rèn)為傳統(tǒng)的瓊脂平板計(jì)數(shù)比生物熒光檢測(cè)成本低,但是實(shí)際成本分析表明,這種快速微生物檢測(cè)方法與傳統(tǒng)方法相比節(jié)省約40%LeCoque,1996/1997)。

        目前用于 ATP熒光儀的試劑均采用單個(gè)一體化試劑,但大多數(shù)廠商提供的為凍干試劑,因而導(dǎo)致其重復(fù)性欠佳。由Hygiena公司推出的 便攜式systemSUREIIATP熒光儀采用全球**的液態(tài)穩(wěn)定熒光素酶試劑snap shot 避免了凍干試劑重復(fù)性欠佳的缺點(diǎn)。 snap shot 可以冷藏保存12個(gè)月,并且能在25℃時(shí)存放6-8周而不喪失活性。更重要的是 snap shotCV25-30%,其可靠性和一致性優(yōu)于其它同類產(chǎn)品3倍,并且 snap shot 適合現(xiàn)有的絕大多數(shù)ATP熒光儀使用。

         

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